文章目录

摘要

ABSTRACT

符号说明

文献综述

1 七厘散各组成药味化学成分研究概况

2 七厘散的临床应用与药理作用研究进展

3 七厘散及各组成药味定性定量分析方法研究现状

4 课题来源与意义

参考文献

前言

第一章 血竭化学成分分析及质量标准研究

第一节 利用UHPLC-QE-Orbitrap HRMS的全面定性分析血竭化学成分

第二节 血竭薄层色谱鉴别方法的建立

第三节 血竭UHPLC特征图谱及多成分定量分析

第四节 小结与讨论

第二章 乳香化学成分分析及质量标准研究

第一节 基于UHPLC-QE Orbitrap HRMS的乳香化学成分全面定性分析

第二节 乳香薄层色谱鉴别方法的建立

第三节 乳香GC-MS特征图谱及多成分含量测定

第四节 小结与讨论

第三章 没药化学成分分析及质量标准研究

第一节 基于UHPLC-QE Orbitrap HRMS的没药化学成分全面定性分析

第二节 没药薄层色谱鉴别方法的建立

第三节 没药GC-MS特征图谱及多成分含量测定

第四节 小结与讨论

第四章 七厘散其它药味的化学成分分析

第一节 利用UHPLC-QE Orbitrap HRMS全面定性分析儿茶化学成分

第二节 利用UHPLC-QE Orbitrap HRMS全面定性分析红花化学成分

第三节 利用GC-MS比较分析天然麝香、养殖麝香和人工麝香化学成分

第四节 小结与讨论

第五章 七厘散化学成分分析及质量标准研究

第一节 利用UHPLC-QE Orbitrap HRMS定性分析七厘散化学成分

第二节 七厘散薄层色谱“一板多测”法的建立

第三节 七厘散HPLC特征图谱及多成分含量测定

第四节 利用GC-MS对七厘散定性分析及多成分含量测定

第五节 基于ICP-MS的七厘散重金属及微量元素测定

第六节 小结与讨论

参考文献

全文总结与展望

1.研究结果

2.讨论与展望

附录

致谢

在学期间主要研究成果

文章摘要:七厘散为伤科常用名方,常用于治疗各种跌打损伤和血瘀疼痛等症。七厘散主要组成药味血竭、乳香、没药为临床常用贵细药。目前,针对七厘散真伪优劣和安全等方面的质量控制手段存在着缺陷,而2020版《中国药典》一部分别收录了血竭、乳香、没药药材及饮片,但其鉴别、含量测定等方面均存在不足,不利于实现其有效的质量控制。本文以七厘散及其主要单味药血竭、乳香、没药为研究对象,基于从单味药到复方的研究思路,建立化学成分全面定性分析方法,并在现行药典质量标准的基础上开展研究,以期完善、提高七厘散和血竭、乳香、没药的质量标准,实现其深入质量分析。针对血竭化学成分组成尚未被全面阐明,首先采用超高效液相串联四极杆静电场轨道阱傅里叶转换联用质谱联用仪（UHPLC-QE Orbitrap HRMS）对血竭进行全面的化学成分定性分析,发现了 58个色谱信号,并初步鉴定了其中的47个化合物;对血竭现有标准中的薄层色谱鉴别法进行了改进,增加定性鉴别指标成分,以二氯甲烷-甲醇-甲酸（40:1:1）为展开剂对血竭进行高效薄层色谱（HPTLC）分析,在254nm和365nm紫外灯下观察到的及香草醛硫酸乙醇溶液显色的各斑点分离良好、显色清晰,并利用建立的薄层色谱鉴别法从10批市售血竭中发现了 4批掺伪龙血竭的样品;采用高效液相色谱-二级阵列管检测器（UHPLC-DAD）建立血竭特征图谱及多成分含量测定方法,发现了血竭素和（2S）-5-甲氧基-6-甲基-7-羟基黄烷（MMF）等23个共有峰,采用聚类分析（CA）和正交偏最小二乘-判别分析（OPLS-DA）找出了差异性共有峰,发现MMF与其质量状况存在较高的相关性;进一步对血竭素和MMF的含量进行了含量测定,各批次血竭素的含量均大于1%,根据结果确定血竭中MMF的含量不应低于2%,对血竭现有标准提出了提升草案。针对乳香现有研究和质量标准存在的不足,利用UHPLC-QE Orbitrap HRMS法对乳香的非挥发性成分进行定性分析,发现了 95个色谱峰,并初步鉴定了其中75个的化学结构;建立了乳香薄层色谱鉴别法,以正己烷-乙酸乙酯-甲酸（4:1:0.1）为展开剂对其进行HPTLC分析,在254 nm波长紫外灯下发现的及香草醛硫酸乙醇显色后的斑点分离度良好;采用气相色谱-质谱联用法（GC-MS）对乳香的挥发性成分进行鉴别,从中鉴定了 38个化合物,并建立了乳香GC-MS特征图谱和含量测定方法,从特征图谱中标定了包含因香酚和乙酰因香酚在内的19个共有峰,确定乳香中因香酚的含量不得低于2%,乙酰因香酚的含量不得低于1%,对乳香现行标准提出了提升草案。针对没药现有研究和现行质量标准所存在的缺陷,首先利用UHPLC-QE Orbitrap HRMS对没药的非挥发性成分进行定性分析,发现了 62个色谱峰,并对其中46个进行了初步结构鉴定;对没药现有标准中的薄层鉴别法进行了改进,增加了其定性鉴别指标成分,以正己烷-乙酸乙酯-甲酸（6:1:0.2）为展开剂对11批市售没药进行HPTLC分析,结果显示天然没药和胶质没药的薄层色谱法存在显著差异,并从中鉴别了3批胶质没药和7批天然没药,另一批没药由于各化学成分含量较低,斑点不明显,暂无法确定其种类;建立了没药GC-MS化学成分定性分析、特征图谱以及含量测定方法,初步鉴定了 52个色谱峰的化学结构,标定了天然没药的特征图谱中13个共有峰以及胶质没药特征图谱中15个共有峰,并对天然没药中的rel-2R-Methyl-5S-acetoxy-4R-furanogermacr-1（10）Z-en-6-one（MAFEO）进行了含量测定,确定天然没药中该化合物的含量不得低于0.1%,在此基础上,对没药现行标准提出了提升草案。为了全面分析七厘散的化学成分组成,进一步对其他单味药的化学成分组成进行了定性分析。利用UHPLC-QE Orbitrap HRMS定性分析儿茶和红花的化学成分组成,分别鉴定了 40个和34个化合物;采用GC-MS对天然、养殖和人工麝香的化学成分进行了比较,其中天然麝香和养殖麝香中麝香酮含量最高,且养殖麝香中还含有较多的甾体类成分如胆甾-3-醇等,人工麝香中检测的成分较少,以麝香酮和5β-雄烷-3,17-二酮为主。在对七厘散各单味药进行系统化学成分定性分析的基础上,采用U HPLC-QE Orbitrap HRMS全面定性分析七厘散的化学成分组成,从中初步鉴定了 91个化合物;针对七厘散薄层鉴别方法存在的不足,建立了“一板多测”薄层色谱法,实现了血竭、儿茶、乳香和没药的快速鉴别;建立了七厘散HPLC特征图谱,标定了儿茶素、表儿茶素、血竭素和MMF等14个共有峰,并对其中儿茶素、表儿茶素、血竭素、MMF和3-乙酰基-11-羰基-β-乳香酸（AKBA）的含量进行了同步测定,确定七厘散中儿茶素含量不得低于3%,表儿茶素不得低于0.015%,血竭素不得低于0.5%,MMF不得低于0.5%,AKBA不得低于0.1%;采用GC-MS对七厘散的挥发性成分进行了定性分析研究,初步鉴定了 58个化合物,并建立七厘散中麝香酮、因香酚、右旋龙脑和乙酰因香酚含量的同步测定方法,以此规定七厘散含右旋龙脑不得低于0.1%,麝香酮不得低于50 ppm,因香酚不得低于0.1%,乙酰因香酚不得低于0.1%;采用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）对七厘散中的汞（Hg）、镉（Cd）、砷（As）、铅（Pb）、铜（Cu）等重金属元素、有害元素及微量元素进行了测定,其中2批七厘散存在铅超标现象,其中的铁和锰元素含量也相对较高。在上述研究结果的基础上,提出了七厘散及主要贵细药味血竭、乳香、没药的质量标准提升草案,为名贵中成药七厘散和常用贵细药血竭、乳香、没药质量控制水平的提高提供了可行的分析方法,为保障临床用药的安全有效提供了大量有效的实验数据。

文章来源：《轻工标准与质量》 网址: http://www.qgbzyzl.cn/qikandaodu/2022/0130/1054.html